T.R. Knight est né le 26 mars 1973 à Minneapolis en Minnesota aux USA.

En 2002, il joue le rôle de Daniel dans « Garmento ». Il interprète ensuite le personnage de Ryan Lemming dans la série « Charlie Lawrence » en 2003. Il apparaît dans un épisode de « Frasier » la même année et en 2004, joue le rôle de Neil Colby dans « Law and Order ». Il apparaît également dans un épisode des « Experts » en 2004 et rejoint le casting de « Grey’s Anatomy » dès 2005 sous les traits de George O’Malley.

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George O’Malley vit en colocation avec Izzie et Meredith. Il est tombé sous le charme de cette dernière, mais, timide, il ne sait pas comment lui déclarer sa flamme … Naïf, il obtient rapidement le surnom de « 007 » pour avoir tué un patient sur la table d’opération. Plus tard, il se marie avec Callie Torres, une chirurgienne orthopédiste.